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mRNA polyA尾检测服务:

PolyA的长度影响mRNA的稳定性和翻译效率,mRNA polyA的长度分布也是一种关键质量属性(CQA)。我们需建立合适的分析方法对mRNA polyA进行表征,以满足临床前或临床用mRNA的质量要求。

青鸟核酸(RNASci)提供全流程的mRNA polyA长度分布检测服务,包括前处理(RNase T1切割)、离子对液相色谱-质谱(LC-MS)和数据分析。

样品类型 青鸟核酸定制化服务
场景1 客户提供全长mRNA样品 RNase T1切割+LC-MS谱图+数据分析
场景2 客户提供酶切后的3’端polyA片段 LC-MS谱图+数据分析

mRNA polyA尾检测原理:

对于由成千上万个核苷酸(nt)组成的长链编码RNA,很难精确分离长度相差 1 nt的RNA片段。为实现 1 nt的分辨率,polyA的检测策略与加帽率检测类似:
首先使用RNase T1处理mRNA,获得3’端polyA片段(长度约为100 nt),随后通过液质联用(LC-MS)的方法获得3’端polyA片段的解卷积质谱图,从而定量评估mRNA的长度分布。

案例分享:

青鸟核酸建立了完善的mRNA polyA长度分布分析方法,涵盖RNase T1酶切处理、oligo dT磁珠纯化、液质联用(LC-MS)检测和数据处理。
我们体外制备了编码荧光素酶的mRNA(luciferase mRNA)并进行了polyA长度分布检测。其3’端polyA片段的LC-MS图谱显示,我们成功分离相差仅1个核苷酸的多聚腺苷酸片段。

mRNA polyA检测流程:

mRNA polyA检测结果: