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随着mRNA疫苗的大规模应用,多种类型的编码RNA处于快速发展阶段,包括常规mRNA,自复制RNA(saRNA)和环状RNA(circRNA)等。编码类RNA通过表达目标蛋白发挥生物学功能。
为检测编码RNA的生物学活性、或LNP递送效率,青鸟核酸(RNASci)建立了基于细胞的RNA效力检测方法,包括细胞转染和目标蛋白的鉴定。我们提供裸RNA、RNA-LNP制剂的生物学活性检测服务,包括多类型细胞转染和目标蛋白检测(荧光信号、生物发光信号、ELISA、Western Blotting (WB)等)。
青鸟核酸mRNA体外表达活性检测服务平台支持的细胞类型包括但不限于:293T、HepG2、HeLa、K562、U937、Raw264.7、Jurkat、AU565等。
案例1:裸mRNA体外表达验证:
我们将几种裸mRNA分别与商业化转染试剂混合,转染至293T细胞。24小时后检测到目标蛋白信号:eGFP(绿色荧光信号)、mCherry(红色荧光信号)、Luciferase(生物发光信号)、新冠病毒SARS-Cov-2刺突蛋白全长(WB特异性条带)。
案例2:RNA-LNP体外表达验证
我们使用一款常规四组分LNP包封编码绿色荧光蛋白(eGFP)的circRNA,将其转染至293T细胞。24小时后检测到绿色荧光信号。
案例3:靶向LNP递送效率评估
使用青鸟核酸研发团队开发的几款细胞靶向LNP(Ab-LNP)包封编码荧光素酶的Luci mRNA,分别转染至目标受体阳性细胞。24小时后,检测到靶向LNP组荧光素酶信号高于常规LNP。