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自复制RNA(saRNA)的序列组成为:5’非编码序列(UTR)、非结构蛋白1-4(nsp 1-4)编码序列、亚基因组启动子(SGP)、目标蛋白编码序列、3’UTR和polyA尾巴。当前主流的saRNA序列设计思路为:在自复制RNA病毒的基因组基础上,将病毒结构蛋白编码区域替换为目标蛋白编码序列。
以SFV为例,其基因组序列包含4个保守序列元件(CSE):
1)CSE1:5’ UTR序列,位于病毒基因组的5’端,功能是作为从(‑)链模板合成(+)链的启动子;
2)CSE2:长度为51-nt,位于CSE1下游的nsP1编码序列中,作为从基因组RNA模板的(‑)链合成的启动子;
3)CSE3:长度约24-nt,位于亚基因组启动子(SGP)附近、病毒结构蛋白编码序列的5’端;
4)CSE4:3’端非编码序列,长度为19-nt,位于目的基因编码序列的下游、polyA的上游,作为启动(‑)链合成的核心启动子。