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脂质纳米颗粒(LNP)是当前最先进的RNA递送系统,其安全性和有效性已在大规模人群中得到验证。当前获批的几种LNP处方均包含四种脂质组分:可电离阳离子脂质、中性磷脂、胆固醇、聚乙二醇(PEG)脂质,LNP配方中的单一脂质成分和含量影响LNP的包封率、递送效果和安全性,应对mRNA-LNP制剂中的脂质组分进行鉴别和含量检测。
青鸟核酸(RNASci)提供定制化的LNP组分检测服务,包括样品前处理、高效液相色谱-带电气溶胶(HPLC-CAD)和数据处理。
电雾式检测器(CAD),也称带电气溶胶检测器,是一种新型通用探测器。CAD特性包括与梯度洗脱的兼容性,不依赖于物质的结构特性和电离效率的响应值,以及具备检测非挥发性和半挥发性物质的能力。由于CAD的高度灵敏性,已广泛用于检测脂质的鉴别和含量检测。 开发适用的液相(HPLC)分离条件使LNP中各脂质完全分离,并借助电雾式检测器(CAD)捕获的信号将各脂质定量,由此实现各脂质组分的鉴别和定量。
青鸟核酸结合超高效液相色谱(UHPLC)与带电气溶胶检测器(CAD),建立了LNP脂质分离和检测方法。我们开发了适用的色谱条件,成功实现4种LNP组分的基线分离。该方法具有很好的重复性。 此外,我们分析了4种脂质组分定量检测的线性结果,R2均大于0.99。